免疫荧光技术又称为荧光抗体技术，是将荧光标记技术和免疫学方法结合起来，利用抗原抗体相互作用从而对组织或细胞内的抗原或抗体物质进行定位、示踪、定性以及相对定量等。

免疫荧光可做单标、双标、三标和四标，即分别对一张切片上的一个、两个、三个和四个抗原进行荧光标记，从而实现定位，定性，半定量的分析。

切片脱蜡至水-抗原修复-血清封闭-一抗孵育-二抗孵育-复染细胞核-封片 

1、脱蜡至水：烘箱内进行烘片，然后将切片进行常规脱蜡至水；

2、抗原修复：使用水浴锅或电炉煮沸热修复，或者中档微波修复，缓冲液为0.01M柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）；

3、封闭：用吸水纸擦干玻片，免疫组画笔在组织周围画圈，滴加5~10%正常血清，室温封闭30min，以减少非特异性染色。

4、一抗孵育：稀释好的一抗4℃孵育过夜，PBS清洗3次×3 min；

5、二抗孵育：将稀释好的带荧光标记的二抗，摇床缓慢孵育1 h，PBS清洗3次×3 min；

6、DAPI复染核，PBS清洗3次×3 min；

7、封片：擦干切片上的液体，用含抗荧光淬灭剂的封片液封片。

1、冰冻切片-20℃保存和运输。

2、石蜡切片常温运输。

3、细胞爬片用固定液浸泡，4℃保存和运输。

1、签订实验协议；

2、交接未处理样品切片或确保组织取材新鲜，固定及时；

3、如需额外购买抗体，实验周期可能适当延长；

4、客户提供实验必要信息，如组织来源、染色数目、实验目的及拍照要求等。

1、实验处理后的切片；

2、样品拍照及照片数据处理；

3、完整的实验报告；

4、详细完整的实验流程。

1、全面且深入的系统化病理研究服务

沃登病理实验中心具有10余年的服务经验，已形成从病理实验、病理成像到病理分析的完整研究体系。一流的硬件平台，经验丰富的技术团队，稳健踏实的做事风格，让我们成为众多科研人员病理实验合作伙伴的首选品牌。

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